生長(zhǎng)特性貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞代數(shù)10代以內(nèi)

背景簡(jiǎn)介Hela細(xì)胞是第一個(gè)來(lái)自人組織和連續(xù)培養(yǎng)維持非整倍體上皮樣細(xì)胞系。Hela細(xì)胞是由G·D·Gey等在1951年從31歲女性黑人的宮頸癌建立。經(jīng)原始組織切片樣品的重新觀察，Jones等將其診斷為腺癌。已知該細(xì)胞系含有人乳頭狀瘤病毒18序列，需在2級(jí)生物安全防護(hù)臺(tái)操作。Hela細(xì)胞角蛋白陽(yáng)性，p53表達(dá)量較低，但表達(dá)正常水平的Prb(視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤抑制因子)。

生物安全等級(jí)2

細(xì)胞規(guī)格1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測(cè)無(wú)

基因表達(dá)情況Lysophosphatidylcholine (lyso-PC) induces AP-1 activity and c-jun N-terminal kinase activity (JNK1) by a protein kinase C-independent pathway. The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining.

保藏機(jī)構(gòu)ATCC; CCL-2 ATCC; CRM-CCL-2 ATCC; CRL-7923 BCRC; 60005 BCRJ; 0100 DSMZ; ACC-57 ECACC; 08011102 ECACC; 93021013；中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所細(xì)胞資源中心

培養(yǎng)基90%MEM+10% FBS+1%PS

培養(yǎng)條件氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存

倍增時(shí)間~32-48 hours

STR鑒定位點(diǎn) Amelogenin：X；CSF1PO：9，10；D13S317：12，13.3；D16S539：9，10；D18S51：16；D19S433：13，14；D21S11：27，28；D2S1338：17；D3S1358：15，18；D5S818：11，12；D7S820：8，12；D8S1179：12，13；FGA：18，21；TH01：7；TPOX：8，12；vWA：16，18；

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。